結直腸癌(CRC)是第三大最常見的癌症，也是癌症相關死亡的第二大原因，根據2018年的數據顯示，估計有(yǒu)180萬新(xīn)病例，近88.1萬人死亡。大多(duō)數結直腸癌患者在确診後已經進入晚期(III、IV期)。III期病例是治愈率較好，但當癌症轉移到遠(yuǎn)處(IV期)時，能(néng)治愈的概率較為(wèi)渺茫。随着各國(guó)學(xué)者對免疫細胞在癌症治療中(zhōng)的探索，也為(wèi)結直腸癌患者帶來了一線(xiàn)生的希望。

近年來，自體(tǐ)免疫增強療法吸引了許多(duō)科(kē)學(xué)家的注意。在過去的二十年中(zhōng)，自體(tǐ)免疫細胞療法在癌症的輔助治療中(zhōng)越來越普遍。自體(tǐ)免疫細胞輸注已被證明對癌症治療是安(ān)全的，當與傳統放療，化療或手術聯合使用(yòng)時，療效提高約30%。細胞免疫療法成功應用(yòng)的關鍵方面是獲得足夠數量的免疫細胞，來根除腫瘤細胞并且不影響體(tǐ)内的其他(tā)細胞。

在越南時代城國(guó)際醫(yī)院近期發表于《國(guó)際分(fēn)子科(kē)學(xué)雜志(zhì)》上的一篇題為(wèi)“Evaluating the Safety and Quality of Life of Colorectal Cancer Patients Treated by Autologous Immune Enhancement Therapy (AIET) in Vinmec International Hospitals”報道中(zhōng)，研究者評估了12例（8名(míng)男性和4名(míng)女性） III 期和 IV 期結直腸癌患者，接受不同數量的自體(tǐ)免疫細胞輸注後的安(ān)全性、有(yǒu)效性以及生存期延長(cháng)等情況。一起來看看該研究的具(jù)體(tǐ)的實施流程和結果。

01

病人入組前的特征

患者的中(zhōng)位年齡為(wèi)59歲(從52.1歲到71.2歲不等)。在該研究患者隊列中(zhōng)，7名(míng)患者表現出組織轉移，5名(míng)為(wèi)非轉移患者。術後 AIET 平均持續時間為(wèi)15.7 ± 7.45個月。

免疫細胞擴增能(néng)力

本研究中(zhōng)的患者接受不同數量的免疫細胞輸注，通常為(wèi)1至4次輸注。PBMNC 的分(fēn)離、免疫細胞提取和培養均在符合 ISO-14644 認證的淨室中(zhōng)進行。通過 Ficoll-Paque 密度離心分(fēn)離 PBMnCs，然後分(fēn)成兩個相等的部分(fēn)，一個用(yòng)于NK細胞擴增，另一個用(yòng)于CTL擴增。

NK細胞的平均百分(fēn)比為(wèi)11.6% ，平均細胞數為(wèi)2.6×106，介于0.59至4.46×106之間。CTL平均百分(fēn)比為(wèi)25% ，平均細胞數為(wèi)6.48×106，介于1.73~22×106之間。

CTL和NK的擴增。(A)培養D0和D14時CTL和NK細胞的形态。細胞在對數生長(cháng)期時以簇狀生長(cháng)。(b)外周血來源的CTL和NK細胞擴增後的免疫表型。

擴增20-21天後，NK細胞和CTL細胞數量明顯增加。在NK細胞數量在1.2 ~ 21.3×109之間，平均為(wèi)8.8 × 109，占細胞總數的85% 。在 CTL細胞數量在0.1至13.3×109之間，占62.4%，平均細胞數為(wèi)6.6 × 109。檢測支原體(tǐ)、細菌和真菌均為(wèi)陰性。内毒素水平

在患者的外周血中(zhōng)，按年齡劃分(fēn)的NK細胞百分(fēn)比呈現顯著差異，60歲以下患者為(wèi)29% ，60歲以上患者為(wèi)21%，按疾病分(fēn)期，III 期患者為(wèi)28% ，IV 期患者為(wèi)22%。此外，III期患者的 CTLs 數量顯着高于IV 期患者(8.58×106 vs 4.52×106)和無轉移患者(8.0×106 vs 4.61×106)。

經過20-21天的培養，CTL的總數在不同的疾病階段有(yǒu)顯著差異，III期患者(8259± 3370×106)的CTL 數量高于IV期患者(5113±3666×106細胞)和發生癌轉的患者，檢測到發生轉移的患者為(wèi)4858±3893×106細胞，無轉移患者為(wèi)8073±3178×106細胞。

此外，年輕患者的CTL比例為(wèi)69% ，而老年患者的比例為(wèi)56%。同時，女性CTL的百分(fēn)比比男性高20% (79% vs 59%)。NK細胞的擴增在年齡、疾病分(fēn)期或腫瘤轉移方面無顯著差異。

經體(tǐ)外擴增細胞輸注的安(ān)全性

對12名(míng)結直腸癌患者進行免疫細胞輸注，平均輸注頻次為(wèi)2.5次。在收集患者外周血的過程中(zhōng)，沒有(yǒu)觀察到不良事件，在輸注 NK 細胞和 CTL 期間也沒有(yǒu)發生嚴重不良事件。

參與這項研究的所有(yǒu)患者的平均生存期為(wèi)32.6 ± 16.3個月(2.72年)。因此，研究結束時觀察到平均生存期增加了14.3 ± 14.1個月。結果顯示，實際存活時間和估計存活時間之間存在統計學(xué)顯著性差異。截至2021年12月，共有(yǒu)5名(míng)患者死亡，7名(míng)患者存活且未複發，生存質(zhì)量良好。

最後一次評估的生存時間、患者狀況和死亡原因

02

受試者的生存質(zhì)量

免疫細胞輸注前後症狀的變化

比較輸注前和輸注後MDASI-GI項目的平均（±标準差）分(fēn)數。疲勞、疼痛、睡眠障礙、悲傷和食欲不振是五個最嚴重的症狀。輸注後，患者報告所有(yǒu)體(tǐ)征均有(yǒu)明顯改善。嘔吐、惡心、口幹、苦惱等症狀明顯減輕，差異有(yǒu)統計學(xué)意義（p≤0.05）。

至于結直腸癌的症狀，除了感到腫脹外，其他(tā)症狀在輸液後均有(yǒu)顯著改善。關于症狀的“反應”維度，8例患者在一般功能(néng)、情緒、工(gōng)作(zuò)、與他(tā)人相處以及行走和享受生活的能(néng)力方面的障礙明顯減少。

注射免疫細胞前後病人生存質(zhì)量的變化

截至2021年12月，12例患者中(zhōng)有(yǒu)7例(58%)無複發且存活和生活質(zhì)量良好，在症狀量表方面，疲勞、惡心嘔吐、呼吸困難、便秘等，有(yǒu)顯著改善（p≤0.05）。然而，疼痛、失眠、食欲不振和腹瀉等症狀仍然是患者健康的負擔。

研究人員進行了一項多(duō)元分(fēn)析，調查了 HRQoL與年齡、性别、疾病分(fēn)期和生存期(存活三年以上和存活三年以下的患者)之間的關系，以揭示患者因素對健康狀況的影響。具(jù)體(tǐ)來說，存活3年以上的患者的身體(tǐ)機能(néng)評分(fēn)比存活3年以下的患者高29.84% (p

最後，研究小(xiǎo)組對于本項研究結果進行了評估總結，參與研究的受試患者的平均生存期，與入組時的預估生存期相比，存活率提高了約1.8倍。這一結果相對高于其他(tā)出版物(wù)，該項研究的1年存活率是83%。因此，免疫細胞療法可(kě)能(néng)是提高CRC存活率的一個解決方案。

鑒于參與該項研究的患者數量較少，并且缺乏一個對照組。研究小(xiǎo)組計劃與對照組一起進行追蹤調查測試，以得出更準确的結論。此外，生物(wù)标志(zhì)物(wù)的确定，以預測更好的治療反應。PD-L1表達已被證明是癌症治療敏感性的預測性生物(wù)标志(zhì)物(wù)，研究小(xiǎo)組還将在随後的研究中(zhōng)使用(yòng) AIET 測定癌症患者的PD-L1水平。

主編随筆(bǐ)：

CTLs和NK細胞在全球範圍内受到高度關注。在Subramani等人發表了一份病案報告，參與受試的結腸癌患者接受了一線(xiàn)化療藥物(wù)和6次輸注的AIET [2]。這個患者在治療期間和第一次輸注AIET後8個月的随訪期間沒有(yǒu)不良反應。

2014年，Subramani 等[3]報道了4例 IV 期結腸癌患者接受了48×106個外周血單核細胞和2700×106個細胞量的NK和T細胞靜脈輸注。結果顯示癌症标志(zhì)物(wù)顯著降低，生活質(zhì)量改善，生存率顯著提高(23個月)。

所以我們有(yǒu)理(lǐ)由相信，随着更多(duō)相關研究的開展，醫(yī)學(xué)人員将獲得更好的免疫細胞治療方案，以攻克癌症。

參考資料：

1、doi.org/10.3390/ijms231911362；

2、Subramani,B;Ratnavelu,K;Pullai,C.R;Krishnan,K;Sugadan,S.D;Deng,X;Hiroshi,T;Autologous Immune Enhancement Therapy;A Case Report of a Stage IV Colonic Cancer.Oncol. Lett. 2013, 5, 1611–1614；

3、Subramani, B.; Pullai, C.R.; Krishnan, K.; Sugadan, S.D.; Deng, X.; Hiroshi, T.; Ratnavelu, K. Efficacy of Ex Vivo Activated and Expanded Natural Killer Cells and T Lymphocytes for Colorectal Cancer Patients. Biomed. Rep. 2014, 2, 505–508.